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感謝蘇州大學(xué)戴老師咨詢我司技術(shù)專員

閱讀次數(shù)：1010 發(fā)布時(shí)間：2015/3/30 14:47:56

前段時(shí)間蘇州大學(xué)戴老師在我司訂購了一批elisa試劑盒，上周末才開始實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)過程中，戴老師說有些地方還不太懂，要求我們的技術(shù)人員給他去電話，于是，我司銷售人員錢經(jīng)理就安排我們專業(yè)的技術(shù)人員給戴老師去電話了，在我們技術(shù)人員耐心的指導(dǎo)下，戴老師當(dāng)時(shí)的問題已經(jīng)解決，后面實(shí)驗(yàn)還有什么問題的話都可以來電咨詢我司技術(shù)人員，在此，戴老師說非常感謝我司技術(shù)人員。
我司技術(shù)專員說為了更好的讓老師們完成實(shí)驗(yàn)，特地為各位新老顧客整理了一份關(guān)于ELISA試劑盒新手入門的使用報(bào)告，在這里分享給各位老師們，供參考。
◎ELISA方法原理
1.雙抗體（原）夾心法：檢測抗原（體）的常見方法，應(yīng)用針對抗原兩個(gè)不同決定族的兩種單抗分別作為固相載體和酶標(biāo)抗體檢測溶液中的抗原（適用于二價(jià)以上抗原，不能測小分子半抗原）。
2.間接法：檢測抗體的方法，利用酶標(biāo)記的抗抗體（第二抗體）檢測已與固相抗原結(jié)合的抗體。
3.競爭法：檢測抗原或小分子半抗原、抗體，以測抗原為例，使待測抗原和酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合，結(jié)果如待測抗原含量越多，與固相抗體結(jié)合的酶標(biāo)抗原就越少，顯色越淺，二者呈負(fù)相關(guān)。
◎操作注意
① 使用干凈的塑料容器配置洗滌液，使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
② 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
③ 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
◎ELISA試劑盒質(zhì)控分析
1.人員培訓(xùn)內(nèi)容包括：①檢驗(yàn)項(xiàng)目的基本原理（ELISA試劑盒原理）；②熟悉檢測技巧，了解易出差錯(cuò)的環(huán)節(jié)及難點(diǎn)；熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）；③熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質(zhì)量控制知識(shí)；④某些特殊項(xiàng)目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關(guān)部門組織的專門培訓(xùn)班，考試合格后持證上崗。
2.基本了解
① 1971年Engvall等人把免疫組化的EIA技術(shù)應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)發(fā)展為ELISA試劑盒技術(shù)。
② 特點(diǎn)：ELISA試劑盒在固相表面組裝免疫活性物質(zhì)形成"免疫吸附劑"。
③ 酶標(biāo)記免疫活性物質(zhì)，進(jìn)行信號(hào)放大；
④ 有二步溫育反應(yīng)二次洗滌過程；
⑤ 靈敏度特異性相對較高。
⑥ 局限性：只能檢測到ng水平
⑦ 精密度差（批內(nèi)CV15-20%）；
⑧ ELISA試劑盒線性范圍窄（一個(gè)數(shù)量級）；
⑨ 存在"HD-HOOK"效應(yīng)。
以上那份是由我司技術(shù)專員為各位老師整理的，有什么問題可以來電咨詢我司錢經(jīng)理，我司錢經(jīng)理會(huì)為您解答，謝謝您的訪問。