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閱讀次數(shù):1366   發(fā)布時(shí)間:2012/10/8 10:00:21

考馬斯亮藍(lán)染色凝膠

1)結(jié)合225毫升甲醇225毫升ddh2o。

2)加0.5克考馬斯亮藍(lán)。

3)使用前,加入50毫升乙酸終濃度10%。

4)染色2小時(shí)染色時(shí)間可以縮短50秒微波;~中等功率。

5)染色后倒出濾入瓶標(biāo)使用的染色。染色可重復(fù)使用一次,但新鮮10%醋酸必須添加。

考馬斯亮藍(lán)脫色凝膠

1)結(jié)合25毫升甲醇437.5毫升ddh2o。

2)使用前,加入37.5毫升乙酸終濃度7.5%。

3)脫色海綿件泡沫包裝)幾個(gè)小時(shí)。它可能需要使用一個(gè)以上的變化退色。微波可以用在這個(gè)階段,但細(xì)節(jié)尚未確定。

考馬斯亮藍(lán)染色

1)結(jié)合50毫升甲醇50毫升ddh2o。

2)加0.1克,考馬斯亮藍(lán)。

3)染色足夠數(shù)量覆蓋在培養(yǎng)皿。

4)清洗輕輕來(lái)回。讓它浸泡一兩分鐘。

5)處理染色方式相似,凝膠染色。

透析管準(zhǔn)備

1)切管適當(dāng)?shù)拈L(zhǎng)度和發(fā)生在一個(gè)大燒杯

2)加上足夠的5%碳酸氫鈉(添加50克每升ddh2o覆蓋。

3)煮滾,讓它煮15分鐘油管地方燒杯內(nèi)下一個(gè)較小的尺寸上的油管。

4)沖洗與過(guò)量的ddh2o。

5)浸泡在管2毫米四乙酸(加10毫升0.2米1升的ddh2o一個(gè)小時(shí)

6)再次沖洗與過(guò)量的ddh2o。

7)存放在0.05%(加0.005毫升每公升ddh2o。

堆疊凝膠

0.4mls丙烯酰胺

0.4mls 10電泳緩沖液

40uls 10%十二烷基硫酸鈉

3.12mls ddh20

2uls定時(shí)

34uls黃芪多糖

如何使15%小型凝膠

* * * *的重要原因,丙烯酰胺是被使用,是非常重要的,戴上手套,整個(gè)程序。

1)測(cè)量出5.152-ml ddh2o到無(wú)菌15-ml-tube。

2)4.58-ml丙烯酰胺。

3)下添加1.1-ml 10分離緩沖液

4)添加110毫升10%十二烷基硫酸鈉。

5)繼續(xù)加入56-ml黃芪多糖。

6)*后,添加5.6-ml定時(shí)。注:定時(shí)聚合劑,以下步驟必須做得相當(dāng)迅速。

7)使用一次性吸管,同質(zhì)化的解決方案,以免造成任何氣泡。

8)使用相同的吸管填充玻璃留下約1英寸的頂部。

9)*后,加入0.5英寸的水飽和正丁醇在頂部的凝膠。注:離開(kāi)未使用部分的解決方案在15毫升。使用此確定如果你的凝膠準(zhǔn)備使用當(dāng)管聚合,所以你的凝膠。

 

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