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產品簡介

大鼠糖原磷酸化酶同工酶II

大鼠糖原磷酸化酶同工酶II

價格:

采購度:245    原產地:美國

發(fā)布時間:2012/1/30 16:18:53

上海恒遠公司是國內免疫學產品主要供應商,提供各種原裝、分裝“大鼠糖原磷酸化酶同工酶II”,質優(yōu)價廉,且售后服務完整,有任何試劑盒方面的問題都能幫您解決。免除您的后顧之憂。并提供免費代檢測,更好的為您服務。如有其他問題請及時聯(lián)系我們。

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產品名稱:大鼠糖原磷酸化酶同工酶II   

產品規(guī)格:96人份/48人份
主要組成成分:試劑盒
性狀:液體
適應癥:科研
貯藏:2-8℃
操作步驟
     方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
  方法二 用于檢測未知抗體的間接法:   
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
4. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
5. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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更新時間:2024/12/23 9:36:37

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