產(chǎn)品名稱：人空泡毒素相關(guān)蛋白A    
英文名稱：Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA KIT  
性狀：液體     
適應(yīng)癥：科研     
規(guī)格：96人份/48人份     
貯藏：2-8℃     
檢測方法：ELISA酶聯(lián)免疫     
產(chǎn)品用途: For laboratory use only,Not for drug or other uses.本公司可提供免費代測服務(wù).
試劑器材
　　1.　試劑
　�。�1）　包被緩沖液（PH9.6 0.05M碳酸鹽緩沖液）:
　　　　NaCO3��1.59克　NaHCO3　 2.93克　　加蒸餾水至1000ml　　
    （2）　洗滌緩沖液（PH7.4 PBS）：0.15M　KH2PO4 0.2克　Na2HPO4?12H2O　2.9克　NaCl  8.0克KCl 0.2克 Tween-20 0.05％ 0.5ml 加蒸餾水至1000ml
　　（3）　稀釋液:牛血清白蛋白（BSA） 0.1克　加洗滌緩沖液至100ml　或以羊血清、兔血清等 血清與洗滌液配成5～10％使用。
　�。�4）　終止液（2M H2SO4）：蒸餾水178.3ml，逐滴加入濃硫酸（98％）21.7ml。
　�。�5）　底物緩沖液（PH5.0磷酸棗檸檬酸）:0.2M Na2HPO4（28.4克／L） 25.7ml　0.1M 檸檬酸（19.2克／L） 24.3ml　加蒸餾水50ml。
　�。�6）　TMB（四甲基聯(lián)苯胺）使用液:TMB（10mg／5ml無水乙醇） 0.5ml底物緩沖液（PH5.5） 10ml0.75％H2O2　32μl
　　（7）　ABTS使用液:ABTS　0.5mg　底物緩沖液（PH5.5） 1ml　3％H2O2　2μl
　�。�8）　抗原、抗體和酶標記抗體。
　�。�9）　正常人血清和陽性對照血清。
　　2.　器材:
　�。�1）　聚苯乙烯塑料板（簡稱酶標板）40孔或96孔，ELISA檢測儀，50μl及100μl加樣器，塑料滴頭，小毛巾，洗滌瓶。
　　（2）　小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。
　�。�3）　4℃冰箱，37℃孵育箱。
注意事項
　　1.　正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以實驗結(jié)果的性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
　　2.　在ELISA中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
　�。�1）　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
　�。�2） 包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度（0.1、1.0和10μg／ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
　�。�3）　酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里地滴定其工作濃度。
　�。�4）　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

相關(guān)產(chǎn)品：

人二磷酸腺苷試劑盒 Human Adenosine diphosphate,ADP ELISA KIT
人蛋白聚糖試劑盒 Human Proteoglycan,PG ELISA KIT
人吡啶酚試劑盒 Human Pyridinoline,PYD ELISA KIT
人5羥基吲哚乙酸試劑盒 Human 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA KIT
人12羥二十烷四烯酸試劑盒 Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid,12-HETE ELISA KIT
人羥脯氨酸試劑盒 Human hydroxyproline,Hyp ELISA KIT
人一氧化氮試劑盒 Human nitric oxide,NO ELISA KIT
人上皮中性粒細胞活化肽78 試劑盒 Human Epithelial neutrophil activating peptide 78,ENA-78 ELISA KIT
人維生素C 試劑盒 Human Vitamin C,VC ELISA KIT
人維生素B6 試劑盒 Human Vitamin B6,VB6 ELISA KIT
人可溶性P選擇素試劑盒 Human soluble P-selectin,sP-selectin ELISA KIT
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1 試劑盒 Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1,TIMP-1 ELISA KIT
人維生素D 試劑盒 Human Vitamin D,VD ELISA KIT
人維生素K1 試劑盒 Human Vitamin K1,VK1 ELISA KIT
人維生素B12 試劑盒 Human Vitamin B12,VB12 ELISA KIT
人維生素D3 試劑盒 Human Vitamin D3,VD3 ELISA KIT
人維生素D2 試劑盒 Human Vitamin D2,VD2 ELISA KIT
人維生素E 試劑盒 Human Vitamin E,VE EELISA KIT
人維生素A 試劑盒 Human Vitamin A,VA ELISA KIT