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產(chǎn)品簡介

人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A

人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A

價格:

采購度:554    原產(chǎn)地:美國

發(fā)布時間:2012/2/6 14:12:23

“人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A ”采用雙抗體夾心ELISA法,本試劑盒適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本,靈敏度極高,多年專業(yè)酶免服務,從標本收集、保存、預試驗、實驗、數(shù)據(jù)分析等全實驗過程我司提供完整的技術指導。

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【產(chǎn) 品 名 稱】:人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A     
【英 文 名 稱】:Human cyclophilin A,CyPA ELISA KIT    
【經(jīng) 營 品 牌】:RD 、 RB、 IBL,提供免費待測服務!
【產(chǎn) 品 包 裝】:96T/48T
【保 存 條 件】:2-8℃
【供應 商】:上海恒遠ELISA試劑盒供應商(國內(nèi)供應商)
【檢測標本標本】:血清或血漿/本產(chǎn)品僅供科研使用
ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。   
原理
  ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而試驗結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
注意事項
  1. 正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以實驗結(jié)果的性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
  2. 在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
 。1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
  (2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被的*適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值而蛋白量*少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
 。3) 酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里地滴定其工作濃度。
  (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

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更新時間:2024/12/23 9:37:33

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